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作者：虎梦吉;凌耀;谭晓怡;张宇昊;陈海;
单位：西南大学食品科学学院;重庆市农业科学院;川渝共建特色食品重庆市重点实验室;
摘要：Holoferritin富含丰富的铁元素，被认为是优良的潜在补铁因子，然而，其制备过程存在工艺繁杂、损失率高等问题，该研究基于铁离子胁迫诱导微生物细胞生物合成Holoferritin体系，优化并建立了Holoferritin高效制备的工艺，并探讨该工艺对Holoferritin结构、性质的影响。琼脂糖凝胶电泳、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明，0.005%核酸酶处理即可有效去除宿主核酸残留，联合加热处理和硫酸铵沉淀处理，即可高效制备高纯度Holoferritin。通过紫外光谱、圆二色谱、傅里叶变换红外光谱、马尔文粒度仪、透射电子显微镜等方法表征Holoferritin的结构，发现该纯化工艺能够维持Holoferritin天然的铁蛋白纳米笼-铁芯完整构象和典型的α-螺旋二级结构。此外，该工艺能够在保证Holoferritin结构完整性的前提下，将蛋白纯化周期由72 h缩短至48 h,为Holoferritin的规模化制备和其在生物医药、食品等领域的应用提供了可靠的技术支撑。
关键词：核酸酶;;Holoferritin;;核酸残留;;生物合成;;蛋白结构
基金资助：西南大学大学生创新创业训练计划项目(202310635100);; 国家自然科学基金面上项目(32472254);国家自然科学基金青年科学基金项目(32201928)
