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作者：李俊杰;王惺雅;杨浩楠;魏娜;赵丽颖;朱淑云;朱建华;何文森;
单位：江苏大学食品与生物工程学院;竹石生物(苏州)科技有限公司;韶关学院,广东省粤北食药资源利用与保护重点实验室;
摘要：该研究旨在利用多重巢式聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)与毛细管电泳技术建立快速检测大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法。该文以大肠埃希氏菌β-葡萄糖苷酶基因(uidA基因)、鼠伤寒沙门氏菌毒力基因(hilA基因)和金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因(nuc基因)为靶标，设计3对嵌套式引物进行2轮扩增，利用毛细管电泳分析产物，通过对2轮巢式PCR退火温度的优化，建立3种食源性致病菌的多重巢式PCR-毛细管电泳检测方法。3对嵌套式引物特异性良好，2轮巢式PCR最佳退火温度分别为54℃和56℃,对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌检测灵敏度可达10~1 copies,对鼠伤寒沙门氏菌检测灵敏度可达10~3copies。该方法快速、准确和高灵敏，适用于能提取DNA的食品样本中3种食源性致病菌的检测，为食源性致病菌的检测提供新方案。
关键词：多重巢式PCR;;毛细管电泳;;食源性致病菌;;特异性;;灵敏度
基金资助：广东省粤北食药资源利用与保护重点实验室开放基金资助项目(FMR2023011Z);; 食品营养与安全湖北省重点实验室开放基金(FNS-HBKL2023A01)
